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分析檢測(cè)方法在藥物研究開(kāi)發(fā)領(lǐng)域具有重要的作用,廣泛應(yīng)用于藥理學(xué)、檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)領(lǐng)域的探究性研究階段,定量測(cè)定和定性分析靶標(biāo)物質(zhì)的呈現(xiàn)、數(shù)量以及功能。生物化學(xué)分析法(Biochemical Assay)和細(xì)胞檢測(cè)分析法(Cell-based Assay)是藥物開(kāi)發(fā)的兩種重要分析方法。
什么是生物化學(xué)分析法?
生物化學(xué)分析法用來(lái)定量分析或者定性分析生物分子。該方法用來(lái)測(cè)定并定量分析重要的細(xì)胞代謝過(guò)程,如細(xì)胞凋亡、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、新陳代謝反應(yīng)等。在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中,科學(xué)家采用大量的生物化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行定量和定性分析。
根據(jù)檢測(cè)特點(diǎn),可以分成三種生物化學(xué)分析法:比色法、熒光法和化學(xué)發(fā)光法。比色法用來(lái)檢測(cè)可見(jiàn)的顏色變化,而熒光法用來(lái)檢測(cè)經(jīng)過(guò)光源激發(fā)導(dǎo)致的發(fā)光信號(hào),化學(xué)發(fā)光則是檢測(cè)經(jīng)過(guò)化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的光信號(hào)。
什么是細(xì)胞檢測(cè)分析法?
細(xì)胞檢測(cè)分析法是用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞對(duì)特定底物或者生物分子的生理反應(yīng)。該方法通常需要進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)。在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中,需要測(cè)定特定底物或分子對(duì)培養(yǎng)的細(xì)胞基因表達(dá)調(diào)控、細(xì)胞代謝過(guò)程的啟動(dòng)或抑制等。
細(xì)胞檢測(cè)分析法的測(cè)定指標(biāo)包括細(xì)胞凋亡、細(xì)胞增殖、氧化應(yīng)激、細(xì)胞毒性、細(xì)胞粘附、細(xì)胞遷移、細(xì)胞轉(zhuǎn)化、細(xì)胞侵襲以及細(xì)胞永生化。因此,根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,有多種分析實(shí)驗(yàn),如細(xì)胞活性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞增殖檢測(cè)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞毒性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞衰老檢測(cè)實(shí)驗(yàn)以及細(xì)胞死亡檢測(cè)實(shí)驗(yàn)等。
生物化學(xué)分析法和細(xì)胞檢測(cè)分析法的相似處
1. 兩種方法都是體外實(shí)驗(yàn)
2. 兩種方法都可在藥物開(kāi)發(fā)中檢測(cè)生物分子在生物學(xué)體系發(fā)揮作用
生物化學(xué)分析法和細(xì)胞檢測(cè)分析法的不同點(diǎn)
生物化學(xué)分析法是基于靶標(biāo)的分析檢測(cè)而細(xì)胞檢測(cè)分析法是基于細(xì)胞的生理反應(yīng)的分析檢測(cè),這就是兩種方法的不同之處。也就是說(shuō),生物化學(xué)分析法是針對(duì)特定的生物分子進(jìn)行定量和定性分析,而細(xì)胞檢測(cè)分析法是檢測(cè)細(xì)胞對(duì)特定底物分子的生理反應(yīng)。
總結(jié)
兩種分析方法都是用來(lái)定量和定性評(píng)估目標(biāo)分子(底物或者細(xì)胞),在藥物開(kāi)發(fā)領(lǐng)域具有重要作用??梢愿鶕?jù)實(shí)際需求進(jìn)行選擇。格瑞納公司提供的多種微孔板,在藥物開(kāi)發(fā)領(lǐng)域具有良好的業(yè)績(jī)口碑。通常情況,經(jīng)過(guò)TC表面處理的黑色或者白色微孔板用于細(xì)胞檢測(cè)分析實(shí)驗(yàn),未經(jīng)過(guò)TC處理但是具有不同的表面結(jié)合力處理的黑色或者白色微孔板用于生物化學(xué)分析實(shí)驗(yàn)。
以96孔微孔板為例,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求進(jìn)行選擇。